植物組織中酷類物質含量的測定

簡介

植物組織中的酚類物質在多酚氧化酶的催化下被氧化為醍，醍可自動聚合成有 色物質，發生褐變。因此，對植物組織內酚類物質進行定量測定具有一定意義，是植物抗性生 理研究中經常用到的一個指標。本實驗的目的在于學習測定酚類物質含量的原理及方法。

原理

酚類物質含量測定常采用 Folin-酚法。酚類物質在堿性條件下可與 Folin-酚試 劑中的磷鴇酸和磷鑰酸反應生成鴇藍和鑰藍化合物，該物質在 700 nm 處有最大光吸收，其吸 光度的大小與酚類物質的含量成正比。因此，通過測定吸光度的大小即可測定植物組織中酚 類物質的含量。

材料與儀器

1. 材料：各種植物組織。

2. 試劑：

(1)Folin-酚試劑：稱取鴇酸鈉 25 g 和磷鋁酸 5 g, 放入回流瓶中，加 12.5 mL 磷酸和 188 mL 蒸饞水，一起回流煮沸 2 h, 冷卻后用蒸僭水定容至 1 000 mL。

(2)10% Na2CC)3：稱取 10 g Na2CO3 溶于 100 mL 蒸儒水中。

(3) 標準酚溶液：0.45 mmol - 鄰苯二酚溶液。

3. 儀器: 分光光度計，離心機，研缽，試管，試管架，移液管等。

步驟

1 . 酚類物質的提?。悍Q取 1 g 植物材料，加少量水研磨成勻漿，充分洗滌研缽，定容至 100 mL。用時可適當稀釋。

2. 標準曲線的制作：按表 56」加入各種試劑，混勻，3 min 后加 10% Na2CO3 2 mL, 振 搖，室溫下靜置 1 h 后測定其在 700 nm 處的吸光度。以酚溶液濃度為橫坐標，吸光度為縱坐 標，繪制標準曲線。

表 56-1 標準曲線制作加樣表

3. 樣品酚含量的測定：將提取液適當稀釋，吸取 2 mL 置于試管中，加 2 mL Folin-酚試 劑，3 min 后加 10% Na2CO3 2 mL, 振搖，室溫下靜置 1 h 后測定其在 700 nm 處的吸光度，在 標準曲線上查出對應的酚濃度廠

4. 結果計算：

c X V

酚含量 (Mmol- g-,) = —

式中：c 一為從標準曲線上查得的酚濃度，卩 mol?mL 1；

V—為樣品體積,mL；

W —為樣品質量?go

注意事項

酚類物質提取時避免被氧化。

常見問題

測定植物組織中酚類物質的含量有何意義？