毒扁豆堿對乙酰膽堿作用的影響實驗

材料與儀器

蟾蜍腹直肌
Acetylcholine chloride Physosti gmine salicylic
Magnus實驗裝置 XWTD204臺式自動平衡記錄儀載波放大器力位移換能器氣泵手術器械水浴管支臺

步驟

1. 連接好實驗裝置，保證實驗條件。
2. 記錄裝置的條件：將臺式平衡記錄儀量程旋紐置于 5 mv,打開記錄筆將筆調到記錄的合適位置。取２ g 砝碼懸掛在換能器的小鉤上，調節載波放大器的“增益”、“調零”旋鈕，使記錄筆上升１大格（25 mm），取下砝碼后，記錄筆又到原位置（加砝碼時調“增益” 旋鈕，取下砝碼時調“調零”旋鈕，需要重復數次即可）。記錄速度 8 mm/min。
3. 標本的制備：將蟾蜍破壞大腦與脊髓，背位固定于蛙板上，剪開腹部皮膚，在恥骨上端以小鑷子分別穿線結扎左右腹直肌的肌腱，于結扎的下方剪斷肌建，沿腹白線向上剪開（應注意避免剪斷腹壁內側的腹壁靜脈）以分離左右腹直肌，再沿腹直肌外緣向上剪開，在第二腱劃高度分用線結扎兩側腹直肌，并在結扎線上方剪斷肌肉。標本制成后，以 Ringer 氏液洗凈，放入置有 Ringer 氏液的燒杯內，備用。
本實驗選用蟾蜍腹直肌的理由是因為蟾蜍腹直肌對乙酰膽堿較敏感，藥物作用較緩和、穩定，易于比較收縮的高度。
4. 標本的懸掛：將腹直肌標本一端固定在浴管底部，另一端懸掛于力位移換能制的小鉤上。腹直肌的張力變化通過力位移換能器、載波放大器后，記錄在臺式平衡記錄儀上。懸掛好標本后, 立即換液１次，再給腹直肌標本加前負荷 2 g（上升１大格、25 mm 即可），穩定 30 分鐘，即可加藥。
5. 給藥方法：按累積給藥法，先觀察各濃度乙酰膽堿收縮蟾蜍腹直肌的量效關系，給藥順序見表 4-8。然后沖洗，先沖洗４－５次，再每隔 10 分鐘換液１次，待腹直肌標本重新恢復至基線（約 40 分鐘）后,加入 10-3 mol/L Physosti gmine（毒扁豆堿）0.1 ml,作用 15 分鐘后，仍按累積給藥法加入各度的乙酰膽堿，觀察毒扁豆堿對乙酰膽堿量效關系的影響，給藥順序見表 4-9。