平衡鹽溶液配制實驗
原理
BSS 是從Ringer 生理鹽水發展起來的,主要由無機鹽和葡萄糖組成。
BSS 中的無機離子不僅是細胞生命所需成分,而且對維持滲透壓、緩沖和調節溶液的酸堿度方面,起著重要作用。
BSS 內含少量的酚紅,作為溶液酸堿度變化的指示劑;溶液變酸時呈黃色,變堿時呈紫紅色,中性時呈桃紅色,借此易于觀察到培養液pH的變化。
材料與儀器
步驟
以Hanks 液為例說明其配制方法
1. 按成分表所示,準確稱量試劑;許多試劑是含有水分的水化物,與不含水分者的稱量不同,應加以換算;
2. 將CaCl2 先溶解在100 ml 水中;
3. 其它成分依次溶解于750 ml 水中(注意應待前一種試劑完全溶解后,再溶解下一種成分);
4. 用數滴5.6 %的NaHCO3 溶液溶解酚紅;
5. 將2緩慢倒入3中,并不時攪動,防止出現沉淀;
6. 將4加入5中;
7. 將6移入容量瓶中,補足水充分混勻;
8. 分裝瓶中,8 磅10 分鐘高壓蒸氣滅菌,4℃冰箱內保存。按上述方法也可配配成 10×濃度的貯存液,在貯存液內加少許氯仿(2—3 ml)防腐;氯仿在高壓滅菌時可揮發掉,不影響使用;加氯仿后要用力混勻,在室溫或4 ℃貯存。用時按比例稀釋,濾紙過濾后分裝入瓶中,包裝高壓滅菌后,于無菌條件下,換上無菌膠塞,置冰箱中保存備用。如液體出現渾濁或沉淀時,應重新配制。
注意事項
配制BSS 時主要應避免鈣、鎂離子的沉淀。