雞血漿的制備
原理
雞血漿為最早用于培養(yǎng)的液體,含有纖維蛋白原和一定的營養(yǎng)成分,當與雞胚胎汁混合后,能發(fā)生凝固,構成細胞生長的環(huán)境,利于細胞向三維空間生長,缺點是易于液化。因制備血漿后不再做無菌處理,全過程必須在嚴密無菌條件下進行。
材料與儀器
雄雞
肝素 生理鹽水 酒精
手術架 棉球 注射器 離心機
步驟
利用生長一年左右體大、健壯的雄雞,采血壓計前一天禁食,多喂水。
制備方法如下:
1. 肝素溶液制備
配制濃度20 mg/100ml 生理鹽水肝素液,9 磅10 分鐘高壓或濾過滅菌,每小瓶中分裝入0.5 ml 貯4 ℃冰箱中備用;
2. 動物準備
縛雞于手術架上,令仰臥,從雞翅取血;展開雞翅,拔除翅根局部羽毛,選血管粗大部位,碘酒和酒精棉球消毒;
3. 采血
取20 ml 無菌注射器,先吸入肝素液少許,濕潤注射器內(nèi)壁后,用16號針頭刺入靜脈,吸血10 ml,立即注入離心管中,搖勻;
4. 分離血漿
3000 轉(zhuǎn)/分 離心10 分鐘后吸出上清血漿,分裝入小瓶中,-20 ℃冰箱貯存?zhèn)溆谩?/span>
也可采用從雞的心臟穿刺取血,方法是從鎖骨上窩部進針,直接穿入心臟;取血量大而快,用此法采血亦可。