雞胚浸出液的制備

原理

雞胚浸出液內(nèi)含有生長因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等，有刺激細(xì)胞生長作用，為早年培養(yǎng)使用的培養(yǎng)用液，現(xiàn)已被合成培養(yǎng)液所代替，但在某些研究中仍有一定應(yīng)用價值。

材料與儀器

雞卵
酒精 碘酒 BSS
孵化箱 燒杯 注射器 離心機(jī)

步驟

1.  孵化
選健康受精雞卵，置入37 ℃溫箱孵化；箱內(nèi)置有水皿，以保持箱內(nèi)濕度，每日翻動卵一次（180 度）；

2.  處理
孵育至9—12 日，取出雞卵置小燒杯中，令氣室端向上，用碘酒和酒精消毒蛋殼；

3.  取胚
用消毒剪剪除氣室端蛋殼，小心撥開尿囊膜，用彎玻棒或變鑷伸到胚體頸下方，輕輕挑起雞胚置入平皿中；

4.  清理
去掉胚眼、血塊、尿囊膜等物；用BSS 沖洗雞胚；
 

5.  粉碎
置入燒杯中用剪刀剪碎胚體后，再用組織研磨器研磨；或放入20—50 ml注射器中（無針頭）直接壓擠入無菌小燒杯中；

6.  浸出
加入等量的Hanks 液，用吸管輕輕吹打均勻，密封后置37 ℃溫箱中30 分鐘；

7.  分離
3000 轉(zhuǎn)/分，離心30 分鐘，無菌取上清分裝入小瓶中，－20 ℃保存；用前再離心一次，取上清使用。

注意事項(xiàng)

1.  全部操作過程要保持無菌，要剔除尿囊膜和眼睛等，以免對細(xì)胞產(chǎn)生不良作用。