水解乳蛋白的配制
原理
水解乳蛋白系乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物,是常用的天然培養基。含有豐富的氨基酸;開始是為猴腎細胞培養設計的,但以后也用于培養基它很多細胞系,包括初代培養細胞等,效果很好。近年由于廣泛使用合成培養基,已代替了乳白蛋白。但其成分簡單,在培養基不足等特殊情況下尚有其應用價值。
材料與儀器
水解乳蛋白
Hanks
燒杯 濾紙 玻璃棒
步驟
1. 稱量:稱0.5 g 水解乳蛋白粉入燒杯中,加少許滅菌Hanks 液調成糊狀;
2. 溶解:補加Hanks 液至100 ml,不斷攪拌,令充分溶解,置室溫1—2 小時,并不時攪拌;
3. 過濾:濾紙濾過,分裝入瓶中;
4. 滅菌:10 磅10 分鐘高壓蒸汽滅菌后,4 ℃冰箱保存。
注意事項
1. 水解乳白蛋白為蛋黃色粉末,易潮解結塊,但不影響使用。其溶液呈微酸性。
2. 不同商品間,在色澤、氨基酸含量和營養價值上可能有一定差異,甚至影響細胞的生長,在更換品種時應進行預試驗,以檢測質量。