酪蛋白的制備實驗

原理

牛乳中主要的蛋白質是酪蛋白，含量約為35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物，等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理，將牛乳的pH調到4.7時，酪蛋白就沉淀出來。用乙醇洗滌沉淀物，除去脂類雜質后便可得到純的酪蛋白。

材料與儀器

牛乳
乙醇 無水乙醚 醋酸 醋酸鈉 乙醇 乙醚
離心機 抽濾裝置 精密pH 試紙或酸度計 電爐 燒杯 溫度計

步驟

1. 將100 ml牛乳放到500 ml燒杯中，加熱到40 ℃，在攪拌下慢慢地加入預熱到40 ℃、pH 4.7的醋酸-醋酸鈉緩沖液100  ml。用精密pH試紙或酸度計調pH至4.7。將上述懸乳液冷卻至室溫，離心(3000 r/min)10 min，棄去上清液，或4層紗布過濾，得酪蛋白粗制品。
2. 用少量水洗沉淀3次，離心(3000 r/min)10 min，棄去上清液。
3. 在沉淀中加入30 ml乙醇，攪拌片刻，將全部懸乳液轉移至布氏漏斗中抽濾，用乙醇-乙醚混合液洗沉淀2次，最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。
4. 取出沉淀，攤開在表面皿上去除乙醚，干燥后得酪蛋白純品。稱重量，計算百分含量。

常見問題

1 . 為什么酪蛋白可在等電點pH 下沉淀下來?
2 . 為什么可以用有機溶劑洗滌蛋白質沉淀?