過氧化物酶的測定實驗-愈創(chuàng)木酚
材料與儀器
酶樣品
磷酸鉀 鄰甲氧基苯酚 H2O2 溶液
分光光度計
步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
0.97 ml 實驗混合物
0.02 ml 酶樣品(用 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.0,稀釋濃縮的原料溶液大約 2000 倍)
開始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2 溶液
隨后,25 ℃、436nm 處吸收值發(fā)生變化,ε436=25.5×103 l/(mol·cm)。(Makinen 和 Tenovon,1982)。
常見問題
試劑:
0.1 mol/L 磷酸鉀,pH 7.0
0.02 mol/L 鄰甲氧基苯酚(2-甲基苯酚,兒茶酚,氫醌單甲基醚,Mr=124.1;24.8 mg 溶于 10 ml 水中)
H2O2 溶液(約 10 mmol/L):0.06 ml 30% H2O2 稀釋于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.0,在 240 nm 處以緩沖液為對照的吸收值約為 0.50。