過氧化物酶的測定實驗-聯二茴香胺
材料與儀器
酶樣品
磷酸鉀 鄰二氫氯化聯茴香胺 H2O2 溶液
分光光度計
步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
0.97 ml 實驗混合物
0.02 ml 酶樣品
開始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2 溶液
記錄 25 ℃ 時、436nm 處吸收值發生變化,ε436=28.3×103 l/(mol·cm)。
注意事項
鄰聯二茴香胺是致癌的!
常見問題
試劑:
0.1 mol/L 磷酸鉀 pH 6.0
0.03 mol/L 鄰二氫氯化聯茴香胺(3,3'--二羥基對二氨基聯苯-二氫氯,Mr=317.2;95 mg 溶于 10 ml 甲醇中)
H2O2 溶液(約 10 mmol/L):0.06 ml 30% H2O2 稀釋于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸鉀溶液 pH 7.0,在 240 nm 處以緩沖液為對照的吸收值約為 0.50。