動(dòng)物組織中喳諾酮類殘留量的測(cè)定方法實(shí)驗(yàn)

材料與儀器

動(dòng)物組織
乙酸-乙腈 正己烷 磷酸鹽-三乙胺緩沖液
相色譜條件色譜柱 離心管 注射器

步驟

1.  前處理

稱取約2 g解凍試樣，切成薄片并放入50 mL離心管中，加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液，均質(zhì)1 min后放入超聲波池中超聲3 min， 4500 r/min離 心5 min，將上清液小心移入100 mL塑料離心管中，離心殘?jiān)?0 mL 1%乙酸-乙腈溶液再提取一次，合并上清液。

將合并后的上清液用乙腈飽和正己烷25 mL脫脂凈化，棄去上層溶液，下層液移至100 mL燒瓶中，于40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，用氮?dú)獯蹈伞Ｔ跉堅(jiān)屑尤? mLHPLC流動(dòng)相，快速混勻和超聲3  min溶解殘?jiān)⑷芙庖恨D(zhuǎn)移至1 mL —次 性注射器中，通過(guò)注射器濾膜（0.45 um）過(guò)濾至HPLC進(jìn)樣小瓶中，進(jìn)行HPLC 測(cè)定分析。

2.  儀器參數(shù)液

相色譜條件色譜柱：4.0 mm × 250 mm× 5 um， Hyprsil ODS；

柱溫：30 ℃；

洗脫模式1: 0.01 mol/L磷酸鹽-三乙胺緩沖液（pH3.0）（0.68 mL磷酸用水稀釋至1 L，再用三乙胺調(diào)節(jié)酸度至pH3.0）。磷酸鹽-三乙胺緩沖液-乙腈（80 + 20）混合，流速：1 mL/min。

洗脫模式2: 梯度洗脫，流速 0.8 mL/min。