胰蛋白酶溶液的配制法
原理
胰蛋白酶主要采自牛或豬的胰臟,是一種黃白色粉末,易潮解,應(yīng)放置冷暗干燥處保存。主要作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解,使細胞相互離散。胰蛋白酶的活力是用解離酪蛋白的能力表示的。
材料與儀器
胰蛋白酶
D-Hanks Dulbecco NaHCO3
濾紙 玻璃棒
步驟
1. 將D-Hanks液或Dulbecco鹽溶液高壓消毒滅菌,用NaHCO3液調(diào)節(jié)pH 至7.2左右;
2. 稱取胰蛋白酶粉末置燒杯中,先用少許消毒的鹽溶液調(diào)成糊裝,然后再補足鹽溶液,攪拌混勻,置室溫4 小時或冰箱內(nèi)過夜,并不時攪拌振蕩;
3. 次日先用濾紙粗濾,再進行過濾除菌,分裝入瓶中,低溫冰箱保存?zhèn)溆茫S脻舛葹?.25%或0.125%;胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可調(diào)pH至7.2左右。