葡萄糖耐量檢測實驗（GTT）

原理

通過過量攝入葡萄糖，在不同的時間節點通過血糖儀對機體的葡萄糖含量進行檢測，以評估機體對葡萄糖的吸收代謝能力。

用途

反映機體對血糖濃度的調節能力。

材料與儀器

葡萄糖粉末（國藥）、生理鹽水、血糖儀

血糖試紙和 1 mL 注射器、手術剪

步驟

1、實驗前準備：

小鼠準備：每組實驗小鼠數量根據實驗設置，一般大于等于 6 只，選取身體狀況良好的雄性鼠作為實驗對象（若是肥胖鼠作為實驗對象，則需要在高脂飲食誘導達到肥胖標準之后進行檢測）。于實驗前一天下午 5 點將小鼠換入干凈的籠子中禁食，禁食 16 h，至次日上午 9 點。禁食期間，小鼠保持正常的飲水。

2、稱取每只小鼠的體重，并用記號筆在小鼠尾巴根部標記序號，以便在實驗中能夠快速辨別所測小鼠（或者在實驗前幾周用剪腳趾的方法給每只小鼠編號）。

3、次日上午 9 點，開始葡萄糖耐受實驗。空腹基礎血糖測定：將小鼠從籠子中取出，輕放于鐵網格之上，用剪刀剪去小鼠尾巴末端約 1~2 mm，輕輕順著尾靜脈擠壓小鼠尾巴，讓血液富集成一滴，滴最開始一滴血液棄去不用，用第二滴的血液。用血糖儀和血糖試紙測定空腹血糖，測定值默認為 0 min 的血糖值。

4、讓小鼠穩定片刻后，開始準備腹腔注射葡萄糖（IPGTT）或灌胃葡萄糖（OGTT）（可預先按照小鼠體重吸取相應體積的葡萄糖溶液，在相應的注射器上編上小鼠編號）。一般葡萄糖耐受實驗的葡萄糖濃度為 2 g/kg 體重，用生理鹽水配制 200 mg/ml 的葡萄糖溶液。

IP GTT：將小鼠輕輕抓起，按照標準的腹腔注射操作用 1 mL 注射器給小鼠注射葡萄糖溶液。注射的體積根據小鼠的體重決定，每 g 體重注射 0.01 mL。從注射完畢開始計時。

OGTT：將小鼠輕輕抓起，按照標準的灌胃操作用 1 mL 注射器連接灌胃針給予小鼠葡萄糖溶液。灌胃的體積根據小鼠的體重決定，每 g 體重灌胃 0.01 mL。從灌胃完畢開始計時；一般情況下，每只小鼠的操作間隔在 1 min，這樣可以準確的按照所規定時間完成對每只小鼠的血糖測定。

5、在 15 min，30 min，60 min，90 min，120 min 按照步驟 3 的操作測定每只小鼠各個時間點的血糖值。

6、實驗完畢后，將每籠小鼠補充上飼料，分析數據。

注意事項

1、保證在規定的時間內能檢測完所有的實驗對象，確保每只小鼠檢測的時間點。

2、操作過程中盡量輕柔，使小鼠不至于過度驚嚇，造成小鼠血糖過高。

3、血糖儀注意電池電量充足，避免使用過程中沒有電。

4、血糖試紙注意保存，不能受潮，污染，以免數據錯誤。

常見問題

1、血糖儀測不出值？

答：可能有兩種情況。第一種就是血糖含量太低，這種在 GTT 實驗中基本不會出現。

但是不排除小鼠很弱小會造成。第二種就是血糖含量太高了，一般血糖儀上會出現 H 來表示。

這個時候一般是由于老鼠具有糖尿病的癥狀導致血糖水平過高檢測不出。遇到此種情況，可把血液用生理鹽水或 PBS 稀釋后再用血糖儀檢測。