97久久国产成人免费网站-色欲色欲久久综合网-韩国精品一区二区三区无码视频-在线看片免费人成视频影院看-国产成人a人亚洲精品无码

服務熱線:13718308763 13718987307       E-mail:Tianyoubzwz@163.com
中國微生物菌種

標準物質查詢網
China microbial strains and
reference materials query network
會員登錄 會員注冊
我已閱讀并同意《服務協議》
注冊
α 突觸核蛋白沉降試驗操作步驟
發布日期:2024-10-16 09:40:33


α 突觸核蛋白沉降試驗操作步驟


材料與儀器

材料:微量離心管(螺帽管)、Laemmli 緩沖液、PBS、SDS-PAGE 所需材料

儀器:離心機,SDS-PAGE 所需儀器


步驟

1. 將 40μL 的 PFF 移入微量離心管中(最好是螺帽管)。

2. 最大速度離心 60 分鐘。

3. 小心將上清液 (40μL) 轉移到新管中。添加 10μL 的 5X Laemmli 緩沖液并標記為「上清液」。

4. 將沉淀懸浮于 40μL PBS 中,再次最大速度離心 30 分鐘。保存上清液并標記為 「洗滌」 。

5. 將沉淀物懸浮在 40μL PBS 中并標記為 「沉淀物」 ,向該部分添加 10μL 5X Laemmli 緩沖液。

6. 90°C 孵育 10 分鐘。

7. 分別加樣 10μL 「上清液」,「洗滌」和「沉淀物」于 15 孔梳 SDS-PAGE 凝膠,然后進行 SDS-PAGE??捡R斯亮藍染色和脫色。我們希望大部分的 alpha 突觸核蛋白 (>75%) 存在于「沉淀物」中。

 

注意事項

原始操作步驟建議使用 40μL,但我們發現 20μL 也可以,并能節省樣品。此外,我們有時會在第二次離心時運行 60 分鐘,而不是建議的 30 分鐘,以確保獲得更好的沉淀物。該沉降試驗應在在原纖化結束時進行,之后再稀釋和分裝。

主站蜘蛛池模板: 岳阳县| 滦平县| 原阳县| 宜昌市| 固安县| 富裕县| 宁城县| 广水市| 龙州县| 济南市| 新河县| 东城区| 确山县| 溆浦县| 石河子市| 含山县| 凤城市| 灌阳县| 锦屏县| 黔江区| 瑞丽市| 新乡市| 正阳县| 麻城市| 昌邑市| 南平市| 文登市| 三门县| 宝坻区| 榆社县| 惠东县| 庄河市| 沙湾县| 云霄县| 翁源县| 汪清县| 利川市| 古浪县| 米脂县| 澳门| 商丘市|