心肌細胞培養實驗
原理
心肌組織是最早利用的培養材料,Carrel曾長期培養過雞胚心肌組織,至今心肌仍不失為好的培養物。最常用的是雞胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎兒心肌等都可應用。心肌是比較容易培養和生長的組織,可應用多種方法進行培養,如懸滴培養、組織塊培養和消化培養法等,主要取心室肌培養,均能獲得良好的生長效果。
材料與儀器
受精雞卵
BSS 胰蛋白酶 酒精 碘酒 眼科剪 玻璃棒
培養瓶
步驟
1. 選新鮮受精雞卵,置溫箱中孵育(溫箱中放有水槽,以維持箱內濕度);每日翻動一次(180 度),孵育9~12 天;
2. 取雞胎;
3. 用眼科剪剪開胸腔,剝出心臟,置入皿中用Hanks液漂洗1~2 次;
4. 小心剪除大的動靜脈,保留心室肌;用組織塊或消化培養法均可。
初代培養的雞胚心肌呈紡錘形,并常雜有成纖維細胞和內皮細胞;心肌細胞亦較基它成分貼壁慢,也可用消化反復貼壁法排除其它細胞成分。在培養成功時,相差顯微鏡下可觀察到橫紋;一周后便可出現節律性收縮現象。