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總氮含量的測定
發布日期:2022-12-14 08:39:30


總氮含量的測定


一、目的
加深理解蛋白質是生命物質基礎;掌握半微量凱氏定氮法測定總氮含量原理和方法。


二、原理
蛋白質是生命的物質基礎,是構成生物體細胞組織的重要成分,蛋白質是含氮的有機化合物,是有機態氮的表現形式。樣品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨,然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再用鹽酸標準溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即得蛋白質含量。用反應式表示如下:

三、實驗材料、主要儀器和試劑
1.實驗材料
植物 、動物組織及食品
2.主要儀器
(1)自動回流消化儀
(2)凱氏定氮儀
圖2 微量凱氏定氮蒸餾裝置

3.試劑
(1)0.1%甲基紅乙醇液:稱取0.1g 甲基紅溶于100mL 60%乙醇中。
(2)0.1%溴甲酚綠乙醇溶液:稱取0.1g 溴甲酚綠溶于100mL 20%乙醇中。
(3)0.2%溴甲酚綠乙醇溶液:稱取0.2g 溴甲酚綠溶于100mL 20%乙醇中。
(4)40%氫氧化鈉:稱取40gNaOH 溶于水中,定容至100mL。
(5)2%硼酸:稱取2g 硼酸用水溶解并定容至100mL。
(6)0.05mol/L 鹽酸標準溶液配制:量取4.5mL 鹽酸,加水稀釋至1 000mL。
(7)溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑制備:量取30mL 0.2%溴甲酚綠乙醇溶液加入20mL0.1%甲基紅乙醇溶液,混勻。
(8)甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑:1 份(5mL)0.1%甲基紅乙醇溶液與5 份(25mL)0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。
(9)其他試劑:無水碳酸鈉、硫酸、硫酸銅,硫酸鉀均為分析純



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