總氮含量的測定
一、目的
加深理解蛋白質是生命物質基礎；掌握半微量凱氏定氮法測定總氮含量原理和方法。
二、原理
蛋白質是生命的物質基礎，是構成生物體細胞組織的重要成分，蛋白質是含氮的有機化合物，是有機態氮的表現形式。樣品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨，然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再用鹽酸標準溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即得蛋白質含量。用反應式表示如下：
三、實驗材料、主要儀器和試劑
1．實驗材料
植物 、動物組織及食品
2．主要儀器
（1）自動回流消化儀
（2）凱氏定氮儀
圖2 微量凱氏定氮蒸餾裝置
3．試劑
（1）0.1%甲基紅乙醇液：稱取0.1g 甲基紅溶于100mL 60%乙醇中。
（2）0.1%溴甲酚綠乙醇溶液：稱取0.1g 溴甲酚綠溶于100mL 20%乙醇中。
（3）0.2%溴甲酚綠乙醇溶液：稱取0.2g 溴甲酚綠溶于100mL 20%乙醇中。
（4）40%氫氧化鈉：稱取40gNaOH 溶于水中，定容至100mL。
（5）2%硼酸：稱取2g 硼酸用水溶解并定容至100mL。
（6）0.05mol/L 鹽酸標準溶液配制：量取4.5mL 鹽酸，加水稀釋至1 000mL。
（7）溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑制備：量取30mL 0.2%溴甲酚綠乙醇溶液加入20mL0.1%甲基紅乙醇溶液，混勻。
（8）甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑：1 份（5mL）0.1%甲基紅乙醇溶液與5 份（25mL）0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。
（9）其他試劑：無水碳酸鈉、硫酸、硫酸銅，硫酸鉀均為分析純
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