羊水細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

原理

羊水中含有胎兒脫落的上皮細(xì)胞，可在體外培養(yǎng)用以檢驗(yàn)胎兒核型。

材料與儀器

碘酒 酒精 營(yíng)養(yǎng)液 血清 秋水仙素 醋酸 甲醇
棉簽 棉球 鑷子 穿針 培養(yǎng)瓶

步驟

1.  抽取羊水

無(wú)菌抽取羊水10～20 ml，立即注入無(wú)菌離心管中；

2.  離心分離

1000 轉(zhuǎn)/分，離心10 分鐘，去上清，留0.5 ml；

3.  培養(yǎng)

加培養(yǎng)液4 ml（含小牛血清1 ml），用NaHCO3調(diào)pH至6.8，置37 ℃培養(yǎng)，在溫箱中培養(yǎng)7～10 天后，可見(jiàn)大量成纖維細(xì)胞或上皮樣細(xì)胞生長(zhǎng)；加秋水仙素0.02～0.8 μg/ml營(yíng)養(yǎng)液，作用10～12 小時(shí)；

4.  其余步驟與傳代細(xì)胞培養(yǎng)染色體制備法相同。