放線菌形態觀察實驗-印片法
原理
將要觀察的放線菌的菌落或菌苔,先印在載玻片上,經染色后觀察。這種方法主要用于觀察孢子絲的形態、孢子的排列及其形狀等。方法簡便、但形態特征可能有所改變。
材料與儀器
細黃鏈霉菌/青色鏈霉菌/弗氏鏈霉菌
石炭酸復紅染液
滅菌的高氏1號瓊脂 平皿 蓋玻片 載玻片 接種環 接種鏟/解剖刀 鑷子 顯微鏡
步驟
1. 接種培養
用高氏 1 號瓊脂平板,常規劃線接種或點種。28 ℃ 培養 4~7 d。也可用扦片法和玻璃紙法所使用的瓊脂平板上的培養物,作為制片觀察的材料。
2. 印片
用接種鏟或解剖刀將平板上的菌苔連同培養基切下一小塊,菌面朝上放在一載玻片上。另取一潔凈載玻片置火焰上散熱后,蓋在菌苔上,輕輕按壓,使培養物(氣絲、孢子絲或孢子)粘附(「印」)在后一塊載玻片的中央,有印跡的一面朝上,通過火焰 2~3 次固定。
3. 染色
用石炭酸復紅覆蓋印跡,染色約 1 min 后水洗。
4. 鏡檢
干后用油鏡觀察。
注意事項
印片時不要用力過大壓碎瓊脂,也不要錯動,以免改變放線菌的自然形態。