腸道桿菌培養物和染色標本觀察

步驟

1、革蘭氏染色標本：大腸桿菌和傷寒桿菌革蘭氏染色呈紅色、G－桿菌，兩端鈍圓，中等大小。

2、瓊脂平板培養物

（1）伊紅美藍培養基：為常用的腸道致病菌分離鑒別培養基。在該培養基上，大腸桿菌能發酵乳糖產酸，使伊紅與美藍合成紫黑色化合物，故其菌落呈紫黑色，傷寒桿菌對乳糖不分解，故其菌落呈無色或微黃色透明菌落。

（2）S-S培養基：為常用的腸道致病菌選擇培養基，內含檸檬酸鈉、煌綠對大腸桿菌有抑制作用，膽鹽對沙門菌、痢疾桿菌有促生長作用，還含有乳糖和酸堿指示劑中性紅。在該培養基上，大腸桿菌能分解乳糖產酸，使菌落呈紅色，傷寒桿菌不能分解乳糖，菌落無色透明。

（3）雙糖鐵斜面：是一種高層斜面培養基，由兩層組成。上層是用蛋白胨水加入1%乳糖和硫酸亞鐵制成的固體斜面，以酚紅為指示劑，可觀察細菌對乳糖 發酵結果和硫化氫試驗結果。下層為含葡萄糖的蛋白胨水半固體，以酚紅為指示劑，可觀察細菌的動力和乳糖發酵能力。接種時，先用接種針按半固體培養基接種法 穿刺接種，沿原線退出后再劃線接種斜面。置37℃恒溫箱經18～24小時培養后觀察細菌生長情況（表1）。

表1 大腸桿菌和傷寒桿菌在雙糖鐵斜面上的生長情況