中藥成分鑒別常用顯色劑及其配制方法
一、通用顯色劑
(1)硫酸
①濃硫酸與甲醇等體積小心混合,冷卻;
②15%濃硫酸的正丁醇溶液;
③5%濃硫酸的乙酸酐溶液;
④5%濃硫酸的乙醇溶液;
⑤濃硫酸與乙酸等體積混合。用以上任一試液噴薄層板后,于110℃烘烤15min,不同類的成分顯不同顏色。
(2)碘
①0.5%碘的氯仿溶液;
②碘蒸氣 在一密閉的玻璃缸內(nèi)預(yù)先放入少許碘結(jié)晶,使缸為碘蒸氣飽和。將薄層板放入缸內(nèi)數(shù)分鐘即可顯色,碘對很多化合物顯黃棕色。
(3)高錳酸鉀-硫酸 高錳酸鉀0.5g溶于15ml 40%硫酸中。檢測易還原性物質(zhì)。
(4)鉻酸-硫酸 重鉻酸鉀5g溶于100ml 40%硫酸中。易還原性物質(zhì)顯色。
(5)熒光顯色液
①0.25%的羅丹明B乙醇溶液;
②0.01%的熒光素乙醇溶液;
③0.1%的桑色素乙醇溶液。用以上任一試液噴薄層板后,在熒光背景下可能顯黑色或其他熒光斑點(diǎn)。
二、專屬性顯色劑
(一)生物堿及含氮類化合物
(1)改良碘化鉍鉀(Dragendorff)試劑
①堿式硝酸鉍0.85g溶于10ml冰醋酸與40ml水中;
②碘化鉀0.8g溶于20ml水中。試液①與試液②等量混合置棕色瓶內(nèi)保存作貯備液。用前將1ml貯備液、2ml冰醋酸與10ml水混合。用于生物堿與某些含氮化合物,顯橙紅色。
(2)碘-碘化鉀(Wagner) 碘1g與碘化鉀10g溶于50ml水(微溫),加2ml乙酸,加水至100ml。用于生物堿,顯棕褐色。
(3)碘鉑酸 5ml 15%氯化鉑溶液加45ml 10%碘化鉀溶液,用水稀釋至100ml。用于生物堿,不同生物堿顯不同顏色。
(4)碘鉑酸鉀 10%六氯鉑酸溶液3ml與97ml水混合,加100ml 6%碘化鉀溶液,混勻。新鮮配制。用于生物堿與其他有機(jī)含氮化合物,不同生物堿顯不同顏色。
(5)Ehrlich
①10%對二甲氨基苯甲醛鹽酸溶液與丙酮按1:4混合。
②對二甲氨基苯甲醛1g,溶于100ml 96%乙醇中。用于吲哚類,有時(shí)噴后要加熱。
(6)硫酸高鈰銨 1%本品的85%磷酸溶液。用于吲哚類,長春花生物堿顯各種顏色。
(7)對二甲氨基苯甲醛-硫酸 65ml濃硫酸與35ml水混合,放冷后加對二甲氨基苯甲醛125mg,再加入5%三氯化鐵溶液0.05ml。本試液可保存一周。用于麥角生物堿。
(8)肉桂醛-鹽酸 肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml 36%鹽酸混合,新鮮配制。用于吲哚類衍生物。
(9)呫噸氫醇 0.1g本品溶于90ml乙醇中,加10ml 36%的鹽酸,用前新鮮配制。用于色氨酸及其他吲哚類生物堿。
(10)氯化鐵-過氯酸 0.5mol/L三氯化鐵溶液1ml與35%過氯酸溶液50ml混合。用于吲哚類生物堿。
(11)三氯化鐵-碘 三氯化鐵5g、碘2g溶于50ml丙酮與50ml 20%酒石酸的混合液中。用于黃嘌呤生物堿類,不同生物堿顯不同顏色。
(12)硫酸鈰-硫酸(改良Sonnenschein試劑) 硫酸鈰0.1g混懸于4ml水中,加1g三氯乙酸,加熱煮沸,放冷,逐滴加入濃硫酸直至渾濁消失。用于生物堿、含碘有機(jī)化合物的顯色,噴后110℃烤幾分鐘,不同生物堿顯不同顏色。
(13)硫氰酸鈷(Ⅱ)試液 硫氰酸銨3g、氯化鈷1g溶于20ml水中。用于生物堿,伯、仲、叔胺類。
(14)碘化汞鉀(Meyer)試劑 1.36g氯化汞和5g碘化鉀各溶于20ml水中,混合后加水稀釋至100ml即可。
(15)硅鎢酸(Bertrand)試劑 5g硅鎢酸溶于100ml水中,加鹽酸少量調(diào)至pH=2左右。
(16)苦味酸試劑 1g苦味酸溶于100ml水中。
(17)鞣酸試劑 鞣酸1g加乙醇1ml溶解后再加水至10ml。
(18)4-甲基傘形酮 0.02g本品溶于35ml乙醇,加水至100ml。用于含氮雜環(huán)化合物。
(19)硫酸銅-聯(lián)苯胺
①0.3g硫酸銅溶于100ml水-乙醇(5:4)的混合液中;
②0.1%聯(lián)苯胺的50%乙醇溶液。用時(shí)先噴試液①,于60℃干燥后再噴試液②。用于吡啶單羧酸的顯色。
(20)氯化銅 0.5%氯化銅溶液。用于肟類。
(21)硝普鈉-鐵氰化物 10%氫氧化鈉溶液、10%硝普鈉溶液、10%鐵氰化鉀溶液和水按(1:1:1:3)混合,冰箱內(nèi)保存(可保存數(shù)周),使用前取適量與等體積丙酮混合。用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的顯色。
(22)硝普鈉-過氧化氫 5%硝普鈉溶液2ml、10%氫氧化鈉1ml與5ml 3%過氧化氫溶液混合后,加15ml水。冰箱可保存數(shù)日。用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的檢測。
(23)三氯化銻試劑 25g三氯化銻溶于75g氯仿中成飽和溶液。用于秋水仙生物堿類。
(二)黃酮類
黃酮類化合物在紫外燈或日光下多顯不同顏色,用氨薰、噴三氯化鋁或氫氧化鈉溶液等皆會使顏色加深或變色。
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