常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制——培養(yǎng)液和培養(yǎng)
(四)培養(yǎng)液 ,培養(yǎng)基
1、人造海水
配方一
氯化鈉( ) 24.72克
氯化鉀( ) 0.67克
氯化鈣( ) 1.36克
氯化鎂( ) 4.66克
硫酸鎂( ) 6.29克
碳酸氫鈉( ) 0.18克
蒸餾水 加到1升
把上述各種鹽溶解在少量蒸餾水中,再加入碳酸氫鈉,最后用蒸餾水稀釋到1000毫升。
配方二
氯化鈉 45.0克 硫酸鎂 0.1克
氯化鎂 5.0克 氯化鐵(1%溶液) 1滴
先把硫酸鎂、磷酸一氫鉀、氯化鐵用少量蒸餾水溶解,加蒸餾水到980毫升。隨后取硝酸鈣溶解在20毫升蒸餾水里,把此溶液逐滴加到上述溶液內(nèi),裝瓶保存。
配方二 克諾普氏(Knop’s)溶液
硝酸鉀 1克 硫酸鎂 1克
磷酸二氫鉀 1克 硝酸鈣 3克
先把硝酸鉀、硫酸鎂、磷酸二氫鉀用少量蒸餾水溶解,加蒸餾水到980毫升。隨后取硝酸鈣,用20毫升蒸餾水溶解,加入到上述溶液內(nèi)。溶液灰形成白色沉淀,在使用是必須搖動。
在以上溶液中加入蔗糖溶液(1~4%),能刺激某些藻類形成游動孢子。該液用于培養(yǎng)綠藻。
3、植物無土培養(yǎng)液
配方 霍格倫德(Hoagland)和斯納德(Snyder)液
硝酸鈣 0.821克 硝酸鉀 0.506克
磷酸二氫鉀 0.136克 硫酸鎂 0.120克
酒石酸鐵 0.005克
把上述鹽類溶解在少量蒸餾水里,然后稀釋到1000毫升。
(五)培養(yǎng)基
1、細菌培養(yǎng)基
配方一 牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基
牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克
氯化鈉 0.5克 瓊脂 1.5克
水 1000毫升
在燒杯內(nèi)加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號后,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2~7.6,分裝在各個試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌30分鐘。
配方二 馬鈴薯培養(yǎng)基
取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細細剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號,煮沸,轉(zhuǎn)用文火燉2小時。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。
配方四 根瘤菌培養(yǎng)基
葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克
碳酸鈣 3克 硫酸鎂( ) 0.2克
酵母粉 0.4克 瓊脂 20克
水 1000毫升 1%結(jié)晶紫溶液 1毫升
先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。
2、放線菌培養(yǎng)基
配方一 淀粉瓊脂培養(yǎng)基(高氏培養(yǎng)基)
可溶性淀粉 2克 硝酸鉀 0.1克
磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克
硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克
瓊脂 2克 水 1000毫升
先把淀粉放在燒杯里,用5毫升水調(diào)成糊狀后,倒入95毫升水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調(diào)整pH值到7.2~7.4,分裝后滅菌,備用。
配方二 面粉瓊脂培養(yǎng)基
面粉 60克 瓊脂 20克
水 1000毫升
把面粉用水調(diào)成糊狀,加水到500毫升,放在文火上煮30分鐘。另取500毫升水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解后,把兩液調(diào)勻,補充水分,調(diào)整pH值到7.4,分裝,滅菌,備用。
3、真菌培養(yǎng)基
配方一 薩市(Sabouraud’s)培養(yǎng)基
蛋白胨 10克 瓊脂 20克
麥芽糖 40克 水 1000毫升
先把蛋白胨、瓊脂加水后,加熱,不斷攪拌,待瓊脂溶解后,加入40克麥芽糖(或葡萄糖),攪拌,使它溶解,然后分裝,滅菌,備用。
本培養(yǎng)菌是培養(yǎng)許多種類真菌所常用的。
配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養(yǎng)基
把馬鈴薯洗凈去皮,取200克切成小塊,加水1000毫升,煮沸半小時后,補足水分。在濾液中加入10克瓊脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖,用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。
把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。
配方三 黃豆芽汁培養(yǎng)基
黃豆芽 100克 瓊脂 15克
葡萄糖 20克 水 1000毫升
洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000毫升,分裝,滅菌,備用。
把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到7.2~7.4,可用來培養(yǎng)細菌和放線菌。
配方四 豌豆瓊脂培養(yǎng)基
豌豆 80粒 瓊脂 5克
水 200毫升
取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。
4、食用菌菌種培養(yǎng)基
配方一 馬鈴薯—蔗糖--瓊脂培養(yǎng)基
20%馬鈴薯煮汁 1000毫升
蔗糖 20克 瓊脂 18克
把馬鈴薯洗凈去皮后,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200克,加水1000毫升,煮沸20分鐘后,過濾。在濾汁中補足水分到1000毫升,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,補足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養(yǎng)基對pH值要求不嚴(yán)格,可以不測定。
配方二 綜合馬鈴薯培養(yǎng)基
20%馬鈴薯煮汁 1000毫升
磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克
葡萄糖 20克 維生素 10毫克
瓊脂 18克
先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解后補足水分,調(diào)整pH值到6。分裝,滅菌,備用。
該培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。
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