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二乙氨乙基(DEAE)-右旋糖酐法

帶正電的DEAE-葡聚糖(dextran) 與帶負(fù)電的核酸磷酸骨架相互作用形成復(fù)合物,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

相對(duì)簡(jiǎn)便,結(jié)果可重復(fù),但對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,轉(zhuǎn)染時(shí)需去除血清

磷酸鈣法

磷酸鈣-DNA 復(fù)合物吸附于細(xì)胞膜,被細(xì)胞內(nèi)吞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

操作簡(jiǎn)便,但重復(fù)性差,不適用于原代細(xì)胞及某些培養(yǎng)細(xì)胞

陽(yáng)離子脂質(zhì)體法

帶正電的脂質(zhì)體與帶負(fù)電的核酸磷酸骨架形成復(fù)合物,被細(xì)胞內(nèi)吞

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,

適用于所有細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效率高,重復(fù)性好,但轉(zhuǎn)染時(shí)需去除血清,轉(zhuǎn)染效果隨細(xì)胞類型變化大

非脂質(zhì)體脂類法

內(nèi)含多種脂質(zhì)成分,與DNA 結(jié)合后轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

適用于所有細(xì)胞,包括許多原代培養(yǎng)細(xì)胞;轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性小,轉(zhuǎn)染時(shí)可以不去除血清

逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)法

通過(guò)感染宿主細(xì)胞將外源基因整合到染色體中

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

可用于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如原代細(xì)胞、體內(nèi)細(xì)胞等。但攜帶基因不能太大,操作復(fù)雜,耗時(shí),需考慮安全因素。

腺病毒介導(dǎo)法

通過(guò)感染宿主細(xì)胞將外源基因整合到染色體中

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染特定宿主細(xì)胞

可用于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,需考慮安全因素

電穿孔法

高脈沖電壓破壞細(xì)胞膜電位,DNA 通過(guò)膜上形成的小孔導(dǎo)入

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

,適用于所有細(xì)胞,但細(xì)胞致死率高,DNA 和細(xì)胞用量大,需根據(jù)不同細(xì)胞類型優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件

基因槍法將

DNA 用顯微重金屬顆粒沉淀,再將包被好的顆粒用彈道裝置射入細(xì)胞,DNA 在胞內(nèi)逐步釋放、表達(dá)

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

可用于人的表皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞系及原代細(xì)胞

顯微注射法

通過(guò)顯微操作將DNA 直接注入靶細(xì)胞核穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)有限,多用于基因工程改造或轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的胚胎細(xì)胞