用于層析的填料（DEAE-纖維素52）如何再生，再利用
問(wèn)： 請(qǐng)問(wèn)各位，用于層析的填料（DEAE-纖維素52）如何再生，再利用，怎么處理保存再利用呢？？我現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)正進(jìn)行到這步，不知道怎么處理，好急，請(qǐng)高手給些意見(jiàn)！謝謝！
另外，在我層析前用酸堿處理DEAE-纖維素52時(shí)，水洗很久都不到合適的PH值，就酸堿處理就花了一天時(shí)間，請(qǐng)那位高手能告訴我詳細(xì)的處理過(guò)程，讓我檢查下自己是否哪里有問(wèn)題。非常感謝！！
答: DEAE52預(yù)處理方案：
取０.５M NaOH 500 ml (加入 NaCl 使?jié)舛葹椋?span style="font-size: 14px; color: rgb(0, 0, 0); font-family: Calibri;">.５M NaCl), 稱(chēng)DEAE-纖維素DE-52 30g, 灑入上述液體中，混勻．室溫放置２h, 換０.５M NaOH 一次．
然后抽濾洗滌，, ０.５M NaOH → H2O至 pH 6.0 →０.５M HCl → H2O至 pH 6.0→０.５M NaOH→H2O至 pH 6.0。
注：這是我做實(shí)驗(yàn)時(shí)的記錄，可以根據(jù)你所需要用的DEAE52的量適當(dāng)放大，縮小。
DEAE-52再生方法：
1.一般而言，只需用高鹽洗至，電導(dǎo)（為電阻的倒數(shù)）達(dá)到1.0左右即可，約0.35M的NaCl。
2.提供一個(gè)較高效的再生柱子的方法。0.1M Na3PO4-0.2%Triton X-100，用于蛋白較雜，柱子污染較嚴(yán)重時(shí)。
問(wèn)： 還想問(wèn)問(wèn)用酸（堿）處理后水洗我要洗好久才能吸到中性，就酸堿處理一次就要6個(gè)小時(shí)的樣子，這是正常的嗎？
答： 0.1％疊氮鈉緩沖液的疊氮鈉緩沖液，中的緩沖液一般緩沖液均可，一般用層析時(shí)的初始緩沖液，我們用的是0.0M 的Tris-HCl從未出現(xiàn)過(guò)問(wèn)題。已用此方法保存了柱子一年，其間一直在使用。
柱子再生的方法有兩類(lèi)，1.是將整個(gè)柱子洗下來(lái)，然后再表面活性劑，NaCl，酸堿處理，這種處理方法比較費(fèi)時(shí)，當(dāng)然也比較徹底，現(xiàn)在這種方法用的比較少，除非柱子污染比較嚴(yán)重；現(xiàn)在通常的方法是2.在柱子用后直接處理，常用的洗滌液中可含有：NaCl、6M或8M 脲、有機(jī)溶劑（如醇類(lèi)等）、表面活性劑等。
我給你的第二種方法應(yīng)該是一種比較強(qiáng)的再生洗滌液，這個(gè)方法也是我最近查文獻(xiàn)查的，因?yàn)槲医鼇?lái)的這個(gè)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)高鹽洗滌不徹底，所以查到了這個(gè)方法，洗滌后要用大量的水將其中的表面活性劑去除，然后再用上柱起始緩沖液平衡。
布氏漏斗應(yīng)該不貴，關(guān)鍵是還得有真空泵才行，想辦法借一個(gè)真空泵吧，好多實(shí)驗(yàn)室都有。
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