細胞處理方式
●凍存管細胞處理方式（復蘇）
1、操作前需將生物安全柜紫外照射30 min，并確認水浴鍋清潔且升溫至37℃。
2、將含有1mL細胞懸液的凍存管在37 ℃水浴鍋中迅速搖晃解凍（盡量在1-2 min內融化），加入到含有9 ml已預熱完全培養基的離心管中輕柔吹打混勻。
3、離心機1000 rpm離心3 min，棄上清，取1ml完全培養基輕柔吹打重懸細胞。
4、將細胞懸液加入含有4 ml完全培養基的T25瓶中，混勻后放置于37 ℃，5% CO2培養箱中培養（如有特殊需求的細胞根據細胞說明書具體培養條件培養）。
5、細胞達到傳代密度后進行傳代，傳代參考復蘇瓶細胞處理方式中的傳代步驟。
●復蘇瓶細胞處理方式（處理及傳代）
（一）到貨后處理
1、 收到復蘇瓶細胞后，用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2~4小時，以便穩定細胞狀態。
2、 仔細閱讀細胞說明書了解細胞相關信息，靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態。
3、 若細胞生長密度超過80%，可正常傳代，首次傳代推薦 1:2~1:3；未超過 80%，移除細胞培養瓶內培養基，預留6mL 左右原瓶培養基繼續培養，直至細胞密度達 80%左右再進行傳代操作，注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋。
（二）傳代（貼壁細胞參考）
1、棄去培養基，用2-3 ml PBS潤洗細胞1-2次。
2、吸棄PBS，在T25瓶（10 cm皿）中加入1-2 ml 0.25 % 胰蛋白酶（含EDTA），輕輕晃動使其鋪勻瓶底（皿底）。
3、放入37 ℃培養箱消化1-2 min（難消化的細胞可以適當延長消化時間）， 顯微鏡下觀察到細胞變圓或呈流沙狀移動但未完全脫落時加2-3 ml完全培養基終止消化，輕柔吹打成均勻的細胞懸液。
4、細胞懸液離心機1000 rpm離心3 min，棄上清，加入新的完全培養基輕柔吹打重懸細胞。
5、根據細胞說明書及細胞具體狀態按比例將細胞懸液分配到新的含有完全培養基的培養瓶（皿）中。
6、細胞懸液混勻后將培養瓶（皿）放置于37 ℃，5% CO2培養箱中培養（如有特殊需求的細胞根據細胞說明書具體培養條件培養）。
●注意事項
1、
請在無菌環境中操作，避免污染。
2、運輸的培養基不能用來再培養細胞，請按照說明配制培養基進行細胞培養。
3、所有動物細胞均視為有潛在生物危害性，處理時需在二級生物安全柜中完成實驗操作。
4、建議復蘇凍存細胞時使用防護手套、衣服及防護面罩避免解凍時出現容器爆炸及蓋子彈開造成人員傷害。
