酵母核糖核酸的提取及組分鑒定
一、目的
了解核酸的組分，并掌握鑒定核酸組分的方法。
二、原理
酵母核酸中RNA含量較多，DNA少于2%。RNA可溶于堿性溶液，當堿被中和后，加入乙醇可使解聚的核糖核酸沉淀，由此即得到RNA粗制品。
三、器材
1．干酵母粉
2．天平
3．燒杯
4．抽濾瓶
5．布氏漏斗
6．移液管
7．玻棒
8．pH試紙
9．離心機
四、 試劑
1．0.2%NaOH溶液
2．乙酸（A.R）
3．95%乙醇
4．無水乙醚（C.P）
5．氨水（C.P）
6．10％H 2 SO 4 溶液
7．5％AgNO 3 溶液：
5g AgNO 3 溶于蒸餾水，定容至l00ml，貯于棕色瓶中。
8．苔黑酚一三氯化鐵 試劑
9．定磷試劑
五、操作
１．RNA的提取
稱取４g干酵母粉于100ml燒杯中，加入0.2%NaOH溶液40ml，沸 水浴 中加熱30min并經常攪拌。加數滴乙酸，使提取液呈酸性。4000r/min離心10～15min ，取上清夜，邊攪邊攪拌邊加入95%乙醇洗滌兩次，無水乙醚洗兩次后，將沉淀轉移至布氏漏斗中抽濾，干燥后即得粗RNA。
２．鑒定：
取上述粗RNA0.5g，加10%H 2 SO 4 溶液5ml，加熱至沸1～2min，制得RNA水解液。
（１）嘌呤堿：
取水解液2ml，加氨水2ml，5％NaOH溶液，觀察是否產生絮狀嘌呤堿的銀化合物。
（２）核糖：
取水解液0.５ml，加苔黑酚-FeCI 3 ；試劑1ml，加熱至沸1min，觀察顏色變化。
（３）磷酸：
取水解液1ml，加定磷試劑1ml， 水浴 上加熱，觀察溶液是否變成藍色。
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