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菌株復蘇與傳代
發布日期:2025-07-02 15:37:30


菌株復蘇與傳代


  • 菌株復蘇

  • 菌株復蘇前,根據菌株生長特性,確定合適培養基和培養環境(需氧或二氧化碳),準備復蘇用品(如槍頭、移液器、接種環、培養基、目標菌株、生理鹽水等)。菌株復蘇根據保藏形式不同,復蘇過程有所區別:

  • 甘油凍存的菌株:在室溫解凍,恢復室溫后,使用移液器吸取適量(如30-50 μl)溶解的菌液,轉移至平板中,使用接種環按照分區劃線方式完成接種。

  • 凍干粉的菌株:可以直接挑取部分凍干粉至平板中,也可以加入少量生理鹽水或者肉湯培養基(非選擇性的),將其溶解,再使用移液器吸取適量溶解菌液至平板,使用接種環按照分區劃線方式完成接種。

  • 磁珠保存的菌株:挑取單個磁珠,在平板中滾動數次即可。

  • 注意事項:所有操作應遵循微生物實驗室生物安全和無菌操作規則,完成接種后,在平板上標記菌株信息(如菌株名稱/編號、傳代數、日期等)。


  • 菌株傳代

  • 菌株復蘇后,在實驗前,一般會進行一次傳代,以確保能夠獲得生長良好的菌落/培養物,該過程與菌株復蘇操作類似,區別是將第一代菌株重新接種一次,不過此過程需要注意菌株的純度:

  • 根據菌落形態特征(菌落大小、顏色、形狀、邊緣、透明度、溶血環等宏觀形態,菌體大小、形狀的著生位置等微觀形態)判斷菌株純度,在相同培養條件下,同一菌株的菌落形態特征應該是相同的,如出現不同菌落形態或與預期菌株生長特點不一致,應對其進行確認(如革蘭氏染色、生理生化檢測、質譜鑒定、測序鑒定等)。

  • 如已確定為菌株污染,可以選擇目標菌株的單菌落進行傳代,若無法確定目標菌株時,應重新復蘇或傳代,同時銷毀被污染的培養物。

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