常見快速生長非苛養菌和苛養菌的藥敏試驗條件與方法

臨床常見快速生長非苛養菌和苛養菌的藥敏試驗方法和試驗條件如下：

1.常見快速生長非苛養菌

a.細菌菌屬

腸桿菌科、銅綠假單胞菌、不動桿菌屬、洋蔥伯克霍爾德菌、嗜麥芽窄食單胞菌、其他革蘭陰性桿菌、葡萄球菌屬、腸球菌屬

b.藥敏試驗方法

（1）紙片擴散法、瓊脂稀釋法、梯度擴散法：將血平板中35℃空氣環境培養18小時至20小時的菌株作為接種物，接種至MHA培養基，然后在空氣環境下，35±2℃培養：一般培養16小時至18小時記錄結果，不動桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌和嗜麥芽窄食單胞菌則需要培養20小時至24小時。

（2）肉湯稀釋法：將血平板中35℃空氣環境培養18小時至20小時的菌株作為接種物，接種至CAMHB培養基，然后在空氣環境下，35±2℃培養：一般培養16小時至20小時記錄結果，不動桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌和嗜麥芽窄食單胞菌則需要培養20小時至24小時。

（3）自動化儀器法：按照自動化儀器說明書操作。

2.常見苛養菌

a.肺炎鏈球菌、其他鏈球菌

（1）紙片擴散法：將血平板中35℃ 5% CO2環境培養18小時至20小時的菌株作為接種物，接種至含5%（V/V）的脫纖維綿羊血的MHA培養基，然后在5% CO2環境下，35±2℃培養：培養20小時至24小時記錄結果。

（2）稀釋法：將血平板中35℃ 5% CO2環境培養18小時至20小時的菌株作為接種物，接種至含2.5%～5%（V/V）裂解馬血CAMHB（CAMHB-LHB），然后在空氣環境下，35±2℃培養：培養20小時至24小時記錄結果。

b.流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌

（1）紙片擴散法：將巧克力平皿中35℃ 5% CO2環境培養20小時至24小時的菌株作為接種物，接種至嗜血桿菌試驗培養基（Haemophilus Test Medium, HTM）瓊脂 ，然后在5% CO2環境下，35±2℃培養：培養16小時至18小時記錄結果。

（2）肉湯稀釋法：將巧克力平皿中35℃±2 5% CO2環境培養20小時至24小時的菌株作為接種物，接種至HTM肉湯，然后在空氣環境下，35±2℃培養：培養20小時至24小時記錄結果。

c.淋病奈瑟菌

（1）紙片擴散法、瓊脂稀釋法：將巧克力平皿中35℃ 5% CO2環境培養20小時至24小時的菌株作為接種物，接種至含有1%特定的生長添加劑的GC 瓊脂，然后在5% CO2環境下，36±1℃（不超過37℃）培養：培養20小時至24小時記錄結果。

d.腦膜炎奈瑟菌

（1）紙片擴散法、瓊脂稀釋法：將巧克力平皿中35℃ 5% CO2環境培養20小時至22小時的菌株作為接種物，接種至含 5%（V/V）的脫纖維綿羊血 的 MHA，然后在5% CO2環境下，35±2℃培養：培養20小時至24小時記錄結果。

（2）微量肉湯稀釋法：將巧克力平皿中35℃ 5% CO2環境培養20小時至22小時的菌株作為接種物，接種至CAMHB-LHB（2.5%～5%，V/V），然后在5% CO2環境下，35±2℃培養：培養20小時至24小時記錄結果。

------詳見《WS/T 807-2022臨床微生物培養、鑒定和藥敏檢測系統的性能驗證》