Folin-酚試劑配制
試劑甲：
A液：Na2CO3 10.00g
NaOH 2.00g
酒石酸鉀鈉（或鉀鹽鈉鹽） 0.25g
混合、溶于500ml蒸餾水中。
B液：CuSO4·5H2O 0.5g
H2O 100.00ml
用前將A液50份與B液1份混合即為試劑甲。
試劑乙：
于磨口回流瓶加入下列試劑
Na2WO4·2H2O 100.00g
NaMoO4·2H2O 25.00g
H2O 700.00ml
85％H3PO4 50.00ml
濃HCl 100.00ml
按上回流冷凝管以小火回流10h后再加：
硫酸鋰 150.00g
H2O 50.00ml
溴水 數滴
開口繼續沸騰15min，驅除過量的溴，冷卻后溶液呈黃色微帶綠色（如仍呈綠色，須重復滴加液體溴步驟）。稀釋至1L，過濾，濾液置于棕色瓶保存。使用時用標準NaOH液滴定，以酚酞為指示劑，然后適當稀釋（加水約1倍）使最終濃度為1mol/L。
標準曲線的制備
⑴ 取標準牛血清白蛋白2.50mg，溶于10ml蒸餾水中，使成250μg/ml。
⑵ 按表8-2稀釋。
表8-2 標準曲線稀釋方法
成分 試 管 號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
牛血清白蛋白標準品（ml） 0 0.2 0.2 0.4 0.1 0.6 0.6 0.8 0.8 1.0 1.0
生理鹽水（ml） 1.0 0.8 0.8 0.6 0.6 0.4 0.4 0.2 0.2 0 0
蛋白含量(μg／ml) 0 50 50 100 100 150 150 200 200 250 250
⑶ 每管加試劑甲5ml，混合后室溫放置10min，再加0.50ml試劑乙（即Folin酚試劑），立即搖勻（否則顯色降低）。
⑷ 30min后測OD650nm。
⑸ 以OD為縱坐標，蛋白含量為橫坐標，繪制標準曲線。
樣品測定
⑴ 待測樣品1ml（適當稀釋至約含25μg－250μg/ml）。
⑵ 加試劑甲、乙。
⑶ 比色、測OD650值。
⑷ 查標準曲線，求蛋白含量乘以稀釋倍數，即為樣品的蛋白含量。
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