97久久国产成人免费网站-色欲色欲久久综合网-韩国精品一区二区三区无码视频-在线看片免费人成视频影院看-国产成人a人亚洲精品无码

服務熱線:13718308763 13718987307       E-mail:Tianyoubzwz@163.com
中國微生物菌種

標準物質查詢網
China microbial strains and
reference materials query network
會員登錄 會員注冊
我已閱讀并同意《服務協議》
注冊
乳酸脫氫酶(LDH)釋放法
發布日期:2022-06-20 09:23:53


乳酸脫氫酶(LDH)釋放法


1)測定方法


1.用含5%小牛血清的RPMI-1640培養液將靶細胞調整到5×104~2×105/ml,此濃度需根據情況預先標定。


2.在96孔圓底細胞培養板中加入靶細胞,每孔加100μl。3個效應細胞自然釋放對照孔不加靶細胞,只加100μl培養液。


3.向各孔加100μl效應細胞,效應細胞與靶細胞的比例根據要求而定,通常為5:1~20:1。自然釋放孔不加效應細胞只加100μl培養液,最大釋放孔中加100μl 1% NP40。每個實驗置三個復孔。


4.置37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養4~6小時。


5.離心培養板200×g 10分鐘。每孔吸出150μl上清液,對應加入另一塊96孔酶聯檢測板中。向第二塊板每孔依次加20μl 0.4mol/L乳酸溶液、20μl 4mmol/L 2-p-碘苯酯-3-p-氯化硝基苯四唑,20μl反應液(含0.03% BSA,2.7U/ml硫辛酰胺脫氫酶,4.5mmol/L氫化型輔酶I(NAD+),1.2%蔗糖的PBS),室溫中放置20分鐘。


6.在酶聯檢測儀上測定各孔的光密度(OD值),檢測波長492nm,參考波長650nm。


2)特異性殺傷活性的計算


殺傷活性(%)=[(OD實驗組-OD總自然釋放)/(OD最大釋放組-OD總自然釋放)]×100%





北京天優福康生物科技有限公司

官網:http://www.dhfpump.com/

服務熱線:400-860-6160 

聯系電話/微信:13718308763  

QQ:2136615612      3317607072

E-mailTianyoubzwz@163.com

 




主站蜘蛛池模板: 尚志市| 梁山县| 南平市| 赣榆县| 驻马店市| 伊川县| 大厂| 忻城县| 白山市| 沛县| 赤峰市| 建德市| 灌云县| 伊金霍洛旗| 波密县| 通海县| 罗山县| 岳西县| 璧山县| 霍山县| 苏尼特右旗| 若尔盖县| 宝清县| 巴青县| 思南县| 贵阳市| 太和县| 灌云县| 炉霍县| 桐乡市| 陆河县| 海安县| 武鸣县| 青龙| 门源| 肥西县| 钦州市| 同江市| 济阳县| 广丰县| 大方县|